PPGCF - Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - UFPR

Teses de Doutorado

A ESPECTROMETRIA DE MASSAS POR INFUSÃO DIRETA ASSOCIADA À QUIMIOMETRIA PARA O DIAGNÓSTICO PRECOCE DE ALGUNS TIPOS DE NEOPLASIAS

THAíS MARTINS GUIMARãES DE FRANCISCO

Programa: Doutorado 2008
Linha de pesquisa: Produção e Qualidade

Orientador: Prof. Dr. Roberto Pontarolo

Data da defesa: 31/05/2012   Nota: 10.0   Conceito: A


Banca Examinadora

Prof. Dr. Roberto Pontarolo Orientador(a)
Prof. Dr. José Domingos Fontana Universidade Federal do Paraná
Profª. Drª. Lúcia Regina Rocha Martins Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Prof. Dr. Dile Pontarolo Stremel Universidade Federal do Paraná - Campus Palotina
Prof. Dr. Marco André Cardoso Instituto Pelé Pequeno Principe

Resumo

O diagnóstico precoce de neoplasias é a melhor estratégia para o prognóstico e tratamento destas doenças. Neste contexto, algumas tecnologias como a metabonômica são empregadas com o objetivo de obter este diagnóstico, pois são capazes de detectar substâncias (biomarcadores) indicativas do progresso ou estágios da doença. O uso de tecnologias que permitam análises rápidas e sensíveis são muito atrativas na descoberta dos biomarcadores e, por consequência, necessárias para obtenção do diagnóstico precoce. No presente trabalho, o uso da infusão direta por espectrometria de massas utilizando um equipamento de baixa resolução associado a análises quimiométricas (DIMS-PCA) está sendo apresentado para detectar alguns tipos de neoplasias em estágios iniciais destas doenças. Para a condução dos estudos, células tumorais de Ehrlich (TE) foram inoculados intraperitonealmente em camundongos das linhagens Balb-C e Swiss e Sarcoma 180 (S-180) em camundongos Swiss, seguido de coleta de sangue intracardíaca após 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias da indução dos tumores. O pré-tratamento das amostras foi realizado por meio de precipitação de proteínas com acetonitrila contendo 0,1% de ácido trifluoroacético. Após a infusão das amostras no espectrômetro de massas, os dados foram observados por meio de análise de componentes principais (PCA). O método utilizado foi capaz de produzir uma adequada classificação das amostras em grupos experimental (com câncer) e controle (sem câncer) e indicar os íons responsáveis pela diferenciação das amostras. Esta classificação foi obtida após três dias do experimento tanto para TE quanto para S-180, refletindo a viabilidade de obter o diagnóstico precoce destas neoplasias. Além disso, uma excelente diferenciação entre os grupos experimentais e controle foi observada até 10 dias da indução do tumor, sugerindo que os resultados não foram influenciados diretamente pela carga do tumor, mas pela resposta do organismo do animal frente à doença. A identificação dos íons relevantes para discriminação das amostras foi realizada por meio de análises de CLAE-EM/EM, os quais foram relacionados com a classe dos fosfolipídeos, particularmente lisofosfatidilcolinas e fosfatidilcolinas, amplamente estabelecidos na literatura por caracterizarem a presença do câncer. A técnica de calibração análise dos mínimos quadrados parciais (PLS) foi utilizada com sucesso na predição do estágio do desenvolvimento das neoplasias estudadas. O método empregado foi considerado sensível, preciso e seletivo em relação a diferenciação das amostras com e sem câncer e é apresentado como uma ferramenta para o diagnóstico precoce de alguns tipos de neoplasias, com a promissora possibilidade de transferência da metodologia para estudos de neoplasias em humanos. 




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