Teses de Doutorado
A ESPECTROMETRIA DE MASSAS POR INFUSÃO DIRETA ASSOCIADA À QUIMIOMETRIA PARA O DIAGNÓSTICO PRECOCE DE ALGUNS TIPOS DE NEOPLASIAS
THAíS MARTINS GUIMARãES DE FRANCISCO
Programa: Doutorado 2008
Linha de pesquisa: Produção e Qualidade
Orientador: Prof. Dr. Roberto Pontarolo
Data da defesa: 31/05/2012 Nota: 10.0 Conceito: A
Banca Examinadora
Prof. Dr. Roberto Pontarolo | Orientador(a) |
Prof. Dr. José Domingos Fontana | Universidade Federal do Paraná |
Profª. Drª. Lúcia Regina Rocha Martins | Universidade Tecnológica Federal do Paraná |
Prof. Dr. Dile Pontarolo Stremel | Universidade Federal do Paraná - Campus Palotina |
Prof. Dr. Marco André Cardoso | Instituto Pelé Pequeno Principe |
Resumo
O diagnóstico precoce de neoplasias é a melhor estratégia para o prognóstico e tratamento destas doenças. Neste contexto, algumas tecnologias como a metabonômica são empregadas com o objetivo de obter este diagnóstico, pois são capazes de detectar substâncias (biomarcadores) indicativas do progresso ou estágios da doença. O uso de tecnologias que permitam análises rápidas e sensíveis são muito atrativas na descoberta dos biomarcadores e, por consequência, necessárias para obtenção do diagnóstico precoce. No presente trabalho, o uso da infusão direta por espectrometria de massas utilizando um equipamento de baixa resolução associado a análises quimiométricas (DIMS-PCA) está sendo apresentado para detectar alguns tipos de neoplasias em estágios iniciais destas doenças. Para a condução dos estudos, células tumorais de Ehrlich (TE) foram inoculados intraperitonealmente em camundongos das linhagens Balb-C e Swiss e Sarcoma 180 (S-180) em camundongos Swiss, seguido de coleta de sangue intracardíaca após 1, 2, 3, 5, 7 e 10 dias da indução dos tumores. O pré-tratamento das amostras foi realizado por meio de precipitação de proteínas com acetonitrila contendo 0,1% de ácido trifluoroacético. Após a infusão das amostras no espectrômetro de massas, os dados foram observados por meio de análise de componentes principais (PCA). O método utilizado foi capaz de produzir uma adequada classificação das amostras em grupos experimental (com câncer) e controle (sem câncer) e indicar os íons responsáveis pela diferenciação das amostras. Esta classificação foi obtida após três dias do experimento tanto para TE quanto para S-180, refletindo a viabilidade de obter o diagnóstico precoce destas neoplasias. Além disso, uma excelente diferenciação entre os grupos experimentais e controle foi observada até 10 dias da indução do tumor, sugerindo que os resultados não foram influenciados diretamente pela carga do tumor, mas pela resposta do organismo do animal frente à doença. A identificação dos íons relevantes para discriminação das amostras foi realizada por meio de análises de CLAE-EM/EM, os quais foram relacionados com a classe dos fosfolipídeos, particularmente lisofosfatidilcolinas e fosfatidilcolinas, amplamente estabelecidos na literatura por caracterizarem a presença do câncer. A técnica de calibração análise dos mínimos quadrados parciais (PLS) foi utilizada com sucesso na predição do estágio do desenvolvimento das neoplasias estudadas. O método empregado foi considerado sensível, preciso e seletivo em relação a diferenciação das amostras com e sem câncer e é apresentado como uma ferramenta para o diagnóstico precoce de alguns tipos de neoplasias, com a promissora possibilidade de transferência da metodologia para estudos de neoplasias em humanos.
Faça o download da tese completa